Perhitungan Mikroba

BAB V

PERHITUNGAN MIKROBA

5.1       Tujuan Percobaan

-  Menghitung jumlah koloni mikroorganisme dalam sampel dengan metode  cawan sebar.

-  Menghitung jumlah koloni mikroorganisme dalam sampel dengan metode cawan tuang.

-  Menghitung jumlah koloni mikroorganisme dalam sampel dengan metode MPN.

5.2       Tinjauan Pustaka

            Pengukuran kuantitatif populasi mikroba sering diperlukan dalam berbagai penelaahan mikrobiologi. Pada umumnya pengukuran dasar populasi mikroba dengan penentuan jumlah sel dan penentuan massa sel. Pengukuran jumlah sel biasanya dilakukan untuk mikroba bersel tunggal, sedangkan penentuan massa sel dapat dilakukan tidak hanya pada mikroba bersel satu tetapi juga untuk mikroba berfilamen, misalnya jamur (Teknik Metode Dasar Mikrobiologi. Lud Waluyo. 2008).

            Starter bakteri yang digunakan adalah bakteri Lactobacillus Bulgaricus dan Streptococcus Thermophilus. Lactobacillus Bulgaricus termasuk jenis bakteri homofermentatif, berbentuk basil (batang) dan berwarna keunguan. Bakteri ini berukuran 0,5-0,8 x 2-9 µm. Bakteri ini dapat memecah gula menjadi asam laktat dan dapat tumbuh dengan baik pada suhu 37˚C. Sedangkan Streptococcus Thermophilus merupakan jenis bakteri berbentuk coccus (bulat), berwarna kebiruan dan dapat tumbuh dengan baik pada suhu 45˚C. Bakteri ini dapat memproduksi asam laktat secara cepat pada kondisi anaerobik.

(ISSN 2338-6649 Jurnal Teknologi Terpadu No. 1 Vol. 2)

            Bakteri memiliki struktur dan organisasi dasar yang sama meskipun dengan bentuk yang berbeda , sel yang terdiri atas lapisan dinding sebagai luar yang kaku dan dibawahnya terdapat membran sel semipermiabel. Didalam membran sel terdapat suatu isi sitoplasma yang termasuk dalam bahan inti dan berbagai komponen serta enzim yang dibutuhkan untuk metabolisme dan pertumbuhan, tergantung pada jenisnya. Bakteri terkadang memiliki struktur tambahan, yaitu diantaranya yang penting adalah cambuk (flagella), kapsul (capsules), dan endospora (endospores), struktur tersebut berpengaruh penting untuk pengenalan dan identifikasi bakteri (Buchanah dan Gibbons, 1974).

(ISSN 2085-5842 Jurnal Ilmiah Perikanan dan Kelautan)

 5.2.1      Perhitungan Jumlah Sel

               Ada beberapa cara mengukur jumlah sel, antara lain dengan hitungan mikroskopik langsung (direct microscopic count), hitungan cawan (plate count), secara elektronik dengan bantuan alat colony counter (penghitung koloni), dan MPN (most probable number). Cara lain menentukan jumlah sel dengan menyaring sampel dengan saringan membrane. Saringan tersebut kemudian diinkubasikan pada permukaan medium yang sesuai. Mikroba yang tertahan pada permukaan saringan menyerap nutrien dari medium dan menghasilkan koloni yang berasal dari satu sel tunggal yang masih hidup.

1.      Hitungan Mikroskopik Langsung

Perhitungan jumlah mikroba secara langsung dapat untuk menentukan jumlah mikroba keseluruhan, baik yang mati maupun yang hidup. Cara ini keseluruhan menggunakan counting chamber. Alat atau metode dapat menggunakan Petroff-Hausser, Haemacytometer, Bacteria counter, Colony counter, atau alat-alat sejenis.

2.      Metode Hitungan Cawan

Metode hitungan cawan didasarkan pada anggapan bahwa setiap sel yang dapat hidup akan berkembang menjadi suatu koloni. Jumlah koloni yang muncul pada cawan merupakan suatu indeks jumlah mikroba yang hidup terkandung dalam sampel.

Metode ini merupakan cara yang paling sensitif untuk menetukan jumlah jasad renik, dengan alasan :

                        -  Hanya sel mikroba yang hidup yang dapat dihitung.

                        -  Beberapa jasad renik dapat dihitung sekaligus.

                        -  Dapat digunakan untuk isolasi dan identifikasi mikroba, karena koloni

                            yang terbentuk mungkin berasal dari mikroba yang mempunyai    penampakan spesifik.

3.      Metode MPN (Most Probable Number)

Metode hitungan cawan dengan menggunakan medium padat, tetapi pada metode MPN dengan menggunakan medium cair di dalam tabung reaksi. Perhitungan MPN berdasarkan pada jumlah tabung reaksi yang positif, yakni yang ditumbuhi oleh mikroba setelah inkubasi pada suhu dan waktu tertentu. Pengamatan tabung yang positif dapat dilihat dengan mengamati timbulnya kekeruhan atau terbentuknya gas di dalam tabung kecil (tabung durham) yang diletakkan pada posisi terbalik, yaitu untuk jasad renik yang membentuk gas.

5.2.2   Bertahan Hidupnya Miroorganisme

            Untuk dapat tetap hidup, tumbuh, dan bereproduksi, sel harus mampu melaksanakan kegiatan selular yang menyangkut banyak reaksi kimia dan perubahan energi. Keseluruhan transformasi ini disebut metabolisme. Sel tersebut mungkin harus merubah nutrien di dalam lingkungannya sebelum nutrien itu dapat diserap. Ia harus dapat mengadakan perubahan-perubahan tambahan terhadap nutrien ini segera setelah nutrien ada di dalam sel. Sebagian dari bahan atau nutrien yang diasimilasi di gabungkan ke dalam senyawa-senyawa yang membentuk sebagian struktur sel. Bahan-bahan lain dirombak untuk menyediakan energi bagi banyak fungsi selular (Dasar-Dasar Mikrobiologi, Michael J.Pelczar, dan E.C.S.Chan).

Macam-Macam Mikroba

1.    Menguntungkan Bagi Kehidupan

No.	Nama Bakteri	Peranan/Fungsi
1	Lactobacillus bulgarius	Memfermentasi susu menjadi lemak
2	Lactobacillus sp	Produksi asinan buah
3	Streptococcus thermophilus	Produksi mentega
4	Pediococccus cereviceae	Produksi sosis
5	Streptococcus tactis	Produksi kefir
6	Acetobacter xylinium	Produksi nata de coco
7	Acetobacter sp	Produksi asam cuka
8	Bacillus brevis	Menghasilkan terotrisin (antibiotik)
9	Bacillus subtilis	Menghasilkan basitrasin (antibiotik)
10	Polymyka	Menghasilkan polimixin (antibiotik)
11	Lactobacillus cassei	Produksi yoghurt
12	Thiobacillus thiozidans	Produksi asam sulfat
13	Entamoeba coli	Membusukkan sisa pencernaan
14	Rhizopus oligosporus	Pembuatan tempe
15	Aspergillus oryzae	Pembuatan tauco
16	Neurospora crassa	Pembuatan oncom
17	Streptococcus laktis	Pembuatan keju
18	Streptococcus cremoris	Pembuatan keju
19	Rhizobium leguminosarum	Fiksasi nitrogen dalam akar kacang
20	Entero bakteria	Bakteri pengurai

2. Merugikan Bagi kehidupan

No.	Nama Bakteri	Peranan/Fungsi
1	Xanthomonas campestris	Menyerang tanaman kubis
2	Xanthomonas oryzae	Menyerang pucuk batang padi
3	Pseudomonas solanacaerum	Penyakit layu pada famili terong-terongan
4	Erwiana amylovora	Penyakit bonyok pada buah-buahan
5	Brucella abortus	Brucelosis pada sapi
6	Streptococcus agalactis	Mastitis pada sapi
7	Bacillus antharacis	Antraks
8	Actinomyces bovis	Bengkak pada radang sapi
9	Salmonella thyposa	Tifus
10	Vibrio comma	Kolera
11	Mycobacterium leprae	Lepra (kusta)
12	Clostridium tetani	Tetanus
13	Staphylococcus	Bisul
14	Pasteurella petis	Pes/sampar
15	Haemophilus influenza	Influenza
16	Diplococcus pneumoniae	Pneumoniae
17	Treponema palidum	Sifilis
18	Neisseria gonorhoe	Kencing nanah
19	Mycobacterium tubercolusis	TBC
20	Salmonella pollurum	Berak kapur pada ayam